Проточная цитометрия

Общий ресурс по проточной цитометрии Предоставляет централизованный доступ к передовым технологиям цитометрии и экспертной технической поддержке для членов UNMCCC, лабораторий UNM и всего научного сообщества. Ресурс предлагает современный анализ проточной цитометрии и высокоскоростную сортировку клеток, используя набор масштабируемых сервисных моделей, включая комплексное получение данных, вспомогательные рабочие процессы и независимое использование, — все они адаптированы для удовлетворения различных потребностей пользователей и уровня их подготовки.

 Сервисы поддерживают широкий спектр приложений, включая классическое иммунофенотипирование, анализ клеточного цикла и апоптоза, исследования микроокружения опухолей и инфильтрации лейкоцитов, а также сортировку отдельных клеток для получения моноклональных линий, создание библиотеки CRISPR или интеграцию в процессы сортировки-секвенирования (например, 10x Genomics scRNA-seq). Массовая сортировка также доступна для повторного культивирования, трансплантации или последующих омиксных анализов.

Опытные специалисты предоставляют консультации по проектированию панелей, разработке протоколов, настройке приборов и интерпретации данных для обеспечения высококачественных, воспроизводимых результатов.

У. Курт Хайнс, Кандидат наук

Директор факультета, Общий ресурс по проточной цитометрии
Доцент кафедры биохимии и молекулярной биологии

Фитц Холл, комната 255
915 Камино Де Салуд NE
Альбукерке, Нью-Мексико 87131
Телефон: 505-681-0014

Напишите письмо доктору Хайнсу

Джош Монтс, магистр наук

Технический директор, Общий ресурс по проточной цитометрии

2325 Камино де Салуд, CRF 217
Комплексный онкологический центр UNM
Центр медицинских наук Университета Нью-Мексико
Альбукерке, Нью-Мексико 87131
Телефон: 505-925-0064

Электронная почта Джоша Монтса

Цитометрическое оборудование: анализаторы

Гонорар ЕНД без поддержки: 94 долларов в час.

Плата, не связанная с UNM: 141.94 долларов в час.

Гонорар ЕНД без поддержки: 73 долларов в час.

Плата, не связанная с UNM: 110.23 долларов в час.

Гонорар ЕНД без поддержки: 113 долларов в час.

Плата, не связанная с UNM: 170.63 долларов в час.

Гонорар ЕНД без поддержки: 79 долларов в час.

Плата, не связанная с UNM: 119.29 долларов в час.

Цитометрическое оборудование: сортировщики клеток

Плата за помощь UNM 
Плата за инструмент: 156 долларов США в час + Техническая плата: 128 долларов США в час.

Плата за не-UNM
Плата за инструмент: 235.56 долларов США в час + Техническая плата: 181.20 долларов США в час.

 

Плата за самостоятельное обучение в UNM: $ 73 /hr

Плата за не-UNM: $ 110.23 /hr

 

Приложения, возможности и признание

Общий ресурс для проточной цитометрии UNM
MSC 08-4640 УНМ CRF 217A
915 Камино де Салуд
Альбукерке, Нью-Мексико 87131
Телефон 505 925 0064

Проточная цитометрия может использоваться для следующих приложений и процедур:

  • иммунофенотипирование
  • Анализ клеточного цикла и плоидности опухолей
  • Анализы пролиферации клеток
  • Ферментативная активность
  • Характеристика и количественная оценка цитокинов
  • Характеристика апоптоза и некроза, а также жизнеспособность клеток
  • Клеточный метаболизм
  • Внутриклеточный поток кальция
  • Окислительно-восстановительные реакции
  • Содержание митохондрий и мембранный потенциал
  • Эффективность трансфекции

Доступны лицензии FlowJo, стоимость уточняйте.

Пользователям с активными лицензиями портала следует обратиться к этой инструкция.

Общий ресурс проточной цитометрии имеет следующие возможности сортировки клеток:

  • Массовая сортировка клеток – максимум 4 различных популяции одновременно
  • Сортировка отдельных клеток в многолуночных планшетах
  • Требуется вспомогательная операция

Приложения для сортировки включают создание моноклональных линий клеток и библиотек CRISPR, включая обогащение после трансфекции, а также очистку гетерогенного образца для повторного культивирования, трансплантации или секвенирования очищенных подмножеств клеток или популяций.

Политика Ресурса заключается в том, что все новые пользователи проходят обучение по конкретной машине. Эти сеансы обучения обычно состоят из двух разных сеансов с участием основного менеджера потока и одного пользователя. Каждое занятие должно длиться от 1 до 2 часов.

Учебные занятия по расписанию через iLabs. По вопросам, касающимся iLabs или настройки учетной записи/PR для использования в общем ресурсе, пожалуйста, электронная почта Палакши Редди Бандапалли или позвоните по телефону 505-272-4539.

Пользователь несет ответственность за предоставление следующего для своей тренировки.

Подготовленные ячейки @ 1x106/мл в пробирках FACS/Эппендорфа – для обучения Cytek Aurora требуются пробирки FACS

  • Ваши клетки должны быть отфильтрованы через фильтр 50 мкм перед запуском на цитометрах. 
  • Объем ячейки должен быть от 500 до 1000 мкл.

Следующие ячейки необходимы для обучения

  • Неокрашенный контроль
  • Компенсационные контроли – одноцветные контроли для каждого флуорохрома. Компенсационные бусины предпочтительны для тусклых/редких маркеров. Клетки предпочтительны для высокоэкспрессируемых маркеров.
  • Полностью окрашенные образцы

Стоимость обучения работе на инструментах:

  • Гонорар ЕНД без поддержки: 192 долларов в час.
  • Плата, не связанная с UNM: 285.39 долларов в час.

Чтобы подтвердить использование этого общего ресурса, пожалуйста, включите в свои публикации следующее:

Это исследование было частично поддержано грантом UNM Comprehensive Cancer Center Support Grant NCI P30CA118100 и общим ресурсом Flow Cytometry.

Другое основное оборудование

  • BioTek Neo2 на общем ресурсе проточной цитометрииУзнайте больше о БиоТек Нео2
  • Гибридный многорежимный планшет-ридер
  • Независимый фильтр и оптика на основе монохроматора
  • Измерения поглощения, флуоресценции, люминесценции, поляризации флуоресценции

Гонорар ЕНД без поддержки: 89 долларов в час.

Плата, не связанная с UNM: 134.39 долларов в час.

  • Magpix в общем ресурсе Flow CytometryУзнайте больше о МАГПИКС
  • Панель с несколькими аналитами на основе магнитных шариков для количественной оценки биомаркеров

Гонорар ЕНД без поддержки: 97 долларов в час.

Плата, не связанная с UNM: 146.47 долларов в час.

Политика и процедуры

Вы обязаны прочитать и понять эту информацию.

Общий ресурс UNM Flow Cytometry Shared Resource предоставляет услуги аналитической проточной цитометрии и сортировки клеток, расположенные в CRF 217. Чтобы обеспечить бесперебойную работу и справедливый доступ к оборудованию для всех исследователей, а также поддерживать оборудование в надлежащем рабочем состоянии, необходимо соблюдать операционные политики и процедуры.

Ключевые операционные политики описаны ниже.

Назначения на все время использования инструмента должны быть запланированы в iLabs.

Для сортировки ячеек требуется помощь оператора.

Назначения для сортировки ячеек требуют предварительного уведомления минимум за 24 часа. Биллинг сортировки ячеек запускается, когда начинается ваша встреча; выставление счетов заканчивается, когда заканчивается сортировка. Если ваша сортировка заканчивается раньше, вам не выставляют счет за это время. 

Утвержденные, обученные пользователи могут записаться на прием для самостоятельной работы в тот же день. 

Назначения на прием в вечернее время и в выходные разрешены только для самостоятельного обучения.

Несмотря на то, что за калибровку и другие процедуры обслуживания отвечает Flow Core, важно, чтобы пользователи правильно выполняли процедуры запуска, выключения и очистки, как описано в учебных занятиях.

Правильная дезактивация и очистка трубок для жидкости и проточной ячейки должны сопровождать каждое использование цитометра.

Процедуры мытья и очистки после сбора считаются нормальным временем выполнения и оплачиваются как часть общего времени приема.

Все пользователи должны пройти курс обучения по лабораторной безопасности BSL1 и BSL2 (включен в курс обучения безопасности при исследованиях, который является обязательным для всех исследователей в кампусе).

BSL3 и радиоактивные пробы не допускаются на наш объект ни при каких обстоятельствах.

Перед доступом к приборам новые пользователи проточной цитометрии должны пройти обучение у основного персонала.

Ожидается, что самостоятельные операторы будут способны выполнять нормальные операции без помощи оператора установки, включая запуск и останов, анализ, стерилизацию и техническое обслуживание (засорение форсунок и т. Д.).

Обратите внимание: если для самостоятельного занятия без посторонней помощи требуется более 20 минут помощи персонала, будет добавлена ставка за «техническое время» для преобразования бронирования в сеанс с частичной или полной помощью: самостоятельное использование + техническое время/час.

Если ваш пробег занимает больше времени, чем ожидалось, и у него будет время для другого пользователя, они имеют право подтолкнуть вас в то время, когда их пробежка должна начаться.

Последний пользователь дня - последний пользователь дня должен выключить аналитический прибор. Если последний человек в течение дня не может прийти в назначенное время, он / она должен проинформировать этого человека перед тем, как выключить машину. Если другого человека нет, последний резервируемый должен прийти в ядро ​​потока и выключить машину.

Резервирование можно сделать в день использования - и это нужно сделать в iLabs. Заполнение точного времени использования в записных книжках каждым прибором гарантирует, что плата будет взиматься за использованное вами время на машине.

Обучение для одного пользователя доступно только по предварительной записи и будет проводиться с использованием образцов, предоставленных исследователем.

Персонал ядра потока определит, когда исследователь сможет действовать самостоятельно.

Пользователи объекта несут ответственность за архивирование всех данных.

Средство общих ресурсов не может служить хранилищем данных.

Пользователи должны немедленно сообщать о проблемах на Объекте Джош Монтс at jmonts@salud.unm.edu.

Мы будем уведомлять пользователей, когда инструмент не работает. Если инструмент, в котором вы сделали бронирование, не работает, мы сделаем все возможное, чтобы помочь вам в сборе ваших данных на другом инструменте, и откажемся от дополнительной платы за помощь. 

Директор доктор Курт Хайнс является окончательным арбитром в решении проблем, возникающих на объекте.